1. 生化试剂盒的标准曲线) 生化试剂盒中的标准品/标曲，建议做复孔，并计算每个浓度标准品的平均OD值；

  由于每次实验环境，操作手法等这一些因素都是有差异的，标曲的真实的情况也会不同，建议每次实验重新制作标准曲线，以便得到更准确、可靠的检测结果。

  说明书上的标曲是作为技术参数的指示标曲，主要是用于呈现拟合后标曲的形态以及最高/最低OD值的质控范围。由于受实验操作、实验环境和检验测试仪器等因素的影响，客户实际做得的标曲可能会跟说明书不太一致，但标曲的相关系数在0.99以上就可以作为有效标曲使用。

  2) 仪器原因：仪器不稳定造成系统误差大，一般仪器需要预热30分钟后再进行比色检测。3) 操作原因：复孔差异大主要是由操作误差引起的，建议实验操作时，小心取样，小心加液，注意移液枪的使用手法，尽可能保持操作的一致性。

  2) 前处理不当：例如测定酶活，使用了导致酶失活的化学试剂等。3) 样本保存不当或提取方法不当等。

  4) 试剂保存不当，包括保存温度、放置太久过期了等，导致试剂盒中某些试剂失效。

  2) 再找样本质量有没问题；3) 若两者都没问题，就要思考实验方案，有时不符合预期的结果反而意味着研究的新意，甚至是新发现。

  4) 若选择了测定系列指标，就能够最终靠相关指标的变化趋势是否一致，来判断该指标的变化是不是正常，因为同时几个相关指标变化都不正常的可能性比较小。

  1) 通常新鲜样本和冻存样本都可用于大多数生化指标的测定，但最好还是采用新鲜样本，因为有的指标检测会受冻存的影响。正常的情况下，随着冻存时间的延长，样本的酶活力会逐渐下降，甚至会完全失活。而某些指标中，冻存样本的检测结果会比新鲜样本检测结果高，如血氨。另外，如果说明书上写明使用新鲜样本，就不能用冻存样本检测。

  2) 组织匀浆样本最好当天检测，若不能当天检测，建议直接冻存组织，而不是组织匀浆。

  1)如果是血清血浆，组织等常规样本类型，可以看说明书或咨询技术上的支持来获取样本的推荐稀释倍数并安排预实验检测。

  1) 预实验方法：在正式检测前，选择预期结果差异较大的2-3个样本，进行不同浓度的样本稀释，然后按照说明书上的实验操作步骤进行预实验，根据预实验的结果（样本稀释之后的结果，计算时先不乘以稀释倍数，也不除以蛋白浓度），再结合试剂盒的检验测试范围来确定样本的最佳稀释倍数。

  2) 预实验的目的：① 确定该试剂盒是不是适合客户的样本检测，防止造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；② 帮助客户熟悉生化试剂盒的操作的过程，尤其是初次使用生化试剂盒的客户；③ 确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；④ 帮助客户了解实验过程中也许会出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整。

  一般检测组织或细胞样本时，要先进行匀浆处理，匀浆的程度不一样释放的蛋白也不一样，测蛋白是为了校正样本匀浆破碎的程度，测蛋白的方法有很多，最常见的是BCA法。一般检测血清血浆样本时，可以直接进行测定，无需测蛋白浓度。

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