（1）由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同 ，因此Bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的误差，在制 作规范曲线时最好选用 γ—球蛋白为规范蛋白质，以削减这方 面的误差。

  以A595nm为纵坐标，规范蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug 、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上制作规范曲线、样品中蛋白质含量的测定

  另取两支洁净的试管（做一重复），参加适宜浓度的待测样品，使 其测定值在规范曲线的范围内，测定办法同上，由样品液的吸光度查标 准曲线即可求出含量。

  （1）灵敏度较高：蛋白质－染料复合物具有极高的消光系数，因 此蛋白质测定的灵敏度较高，最低检出量为1ug蛋白质。

  2、 若挑选在旋涡混合器上混合，留意别太剧烈，避免发生很多气泡而难于消 除。

  说出你所知道的几种蛋白质定量测定的方 法，并与考马斯亮蓝染色法相比较各有何优 缺陷？

  酸性溶液两者结合，使染料溶液的 最大吸收峰的方位，由465nm变为 595nm，溶液的色彩也由棕黑色变为 兰色。

  （2）仍有一些物质搅扰此法的测定，首要的搅扰物质有：去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和0.1M的NaOH

  （3）规范曲线也有细微的非线性，因此不能用Beer规律进行核算，而只能用 规范曲线来测定不知道蛋白质的浓度。

  1、 假如要求严厉，最好在试剂参加后的5~20min内测定光 吸收，由于最近一段时间内色彩是最安稳的。