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各种染色办法大荟萃
发表时间: 2024-11-25 22:38:09 作者: 产品中心
制备乙液时,待硝酸银溶解后,取出10毫升备用,向余下的90毫升硝酸银液中滴加浓氢氧化铵,先呈很稠密的沉积,再持续滴加至刚刚溶解沉积成弄清液停止。再将备用的硝酸银溶液渐渐逐滴参加弄清液中,先出现薄雾,但轻摇则消失,持续边滴加边摇摆,待弄清液出现略有细微不散失的薄雾状停止。如雾重,则银盐沉积,不宜运用。
(2)4% 副品红液:取盐酸副品红 (EM 级)1 g,溶于蒸馏水 20 ml 内,再参加 10m1/L 的 HCl 5m1,稍加温以添加溶解度,过滤、贮室温下。于运用前,取等量副品红液与新鲜的 4% 亚硝酸钠混合,之后用淀粉碘化物试纸测验,瞬间试纸应变为蓝色才合格,假如不变色,应参加更多的亚硝酸盐。
甲基绿水溶液的抽提:甲基绿为绿色粉末,属三苯甲烷染料,这种染料是由氯代甲烷效果于成果晶紫而构成的一种化合物。因为甲基化效果,甲基绿就比甲基绿后,所引入的甲基连接得并不结实,简单从甲基绿中脱失。另一方面,在甲基化过程中,还有一部分结晶紫并没有生成甲基绿,因而,也有的人觉得甲中,常有少数的甲基紫或结晶紫成份。可是,也有的人觉得甲基紫乃是甲基绿的衰落产品,甲基绿在贮存过程中,会不断发生甲基紫。因而,在制造试剂时,有必要先将甲基绿所含的甲基紫或结晶紫抽提出来,才能使细胞核内的脱氧核糖核酸染成绿色。抽提办法是取 2% 甲基绿水溶液 20 ml 倾入洁净分液漏斗,参加三氯甲烷 20 ml 充沛摇摆混合,使其内的甲基紫溶于三氯甲烷中而呈紫赤色。旋动分液漏斗下部的砂塞,渐渐把如此重复替换三氯甲烷,直到三氯甲烷无紫赤色停止,即可得到得纯的甲基绿溶液。
(a)电离效果:脱氧核糖核酸和核糖核酸都有磷酸基,又有碱基,故为两性电解质。在必定的条件下,能够电离而带电荷,因而都有必定的等电点。甲基绿和派洛宁在水中电离后,都发生带阳电荷的离子。甲基绿电离后,在五价氮处发生二个正电荷,碱性较强。派洛宁电离后仅发生一个正电荷,碱性较甲基绿弱,在染色时二者进行竞赛,碱性较强的甲基绿就与胞核(等电点 pH3.8~4.2)进行极性吸着而结合,碱性较弱的派洛宁与胞质(等电点 pH4.6~5.2)吸附结合。
(b)聚合效果:甲基绿对聚合高的 DNA 有亲和力,派洛宁对聚合低的 RNA 有亲和力。因而,思虑在绿选染 DNA,而派洛宁选染 RNA。使用:PNA 首要存在于胞质及核仁内,它主导细胞的蛋白质组成。在细胞增生,胞质蛋白质组成亢进时,核仁和胞质的 PNA 添加。因而,恶性瘤细胞核仁巨大,胞质嗜碱。浆细胞和免疫母细胞胞质组成免疫球蛋白,胰腺上皮组成胰蛋白酶。因而,这些细胞胞质有很强的嗜碱性。胞质嗜碱,是蛋白质组成增强的标志。
TTC 和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反响,生成赤色的甲月赞,用来表明细胞的生机。制造多为 2%,染色要避光,37 度条件下,它是点评脑缺血损害常用的目标。
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(2)草酸铵结晶紫(亦称赫克结晶紫)染色液:取结晶紫饱满酒精溶液2mL,加蒸馏水18mL稀释10倍,再参加1%草酸铵水溶液80mL,混合过滤即成。(3)革兰氏碘溶液:将碘化钾2g置乳钵中,加蒸馏水约5mL。2...
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